PCR,即聚合酶鏈反應(yīng),是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法,也是廣泛應(yīng)用于生物學(xué),醫(yī)學(xué)和臨床領(lǐng)域的實驗技術(shù)。它的特點是可以大大增加DNA的痕量。實驗室分為四個區(qū)域,每個工作區(qū)域必須嚴格按一個方向輸入。不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如,不同的顏色)。工人離開每個工作區(qū)時不得帶工作服。四個領(lǐng)域是:
1.試劑準備區(qū)
2.樣品處理區(qū)
3.核酸擴增區(qū)
4.產(chǎn)品分析區(qū)域

PCR實驗室可以是分散形式或組合形式。為了完成一組PCR實驗,通常應(yīng)完成試劑制備,樣品處理,核酸擴增和產(chǎn)物分析的四個實驗過程。如果實驗技術(shù)要求,則應(yīng)增加樣品破碎過程。
1.分散PCR實驗室
所謂的分散式PCR實驗室是指完成上述實驗過程的實驗室彼此遠離,并以分散的形式布置。對于具有這種布置的PCR實驗室,由于每個實驗都很難相互干擾,因此不需要特殊條件。
2.組合式PCR實驗室
所謂組合PCR實驗室是指將完成PCR的四個實驗過程的實驗室彼此相鄰布置以形成獨立的實驗區(qū)域的形式。對于組合PCR實驗室,由于各種實驗的集中安排,很容易引起相互干擾。因此,對整體布局和屏障系統(tǒng)有一定的要求。每個房間的入口處都有緩沖室,以減少室內(nèi)和室外空氣的交換。試劑制備室和樣品處理室應(yīng)有輕微的正壓,以防止含有核酸氣溶膠的空氣進入并造成污染;核酸擴增室和產(chǎn)物分析室應(yīng)具有輕微的負壓,以防止含氣溶膠的核酸擴散到污染試劑和樣品中。
如果使用熒光PCR儀,則可以將擴增室和產(chǎn)物分析室合并在一起。
如果房間深度允許,可以在PCR內(nèi)設(shè)置專用走廊。需要指出的是,在減少室內(nèi)和室外空氣的交換中,緩沖室比專用走廊更有意義。
每個區(qū)域之間應(yīng)存在單向?qū)嶒炦^程流,物流,人員流和空氣流,以形成單向過程的保護性屏障,以避免實驗之間的相互干擾并防止核酸氣溶膠污染實驗過程和產(chǎn)生錯誤的結(jié)果。
PCR實驗室的氣流方向必須嚴格按照逐漸降低試劑存儲和制備區(qū)域→樣品制備區(qū)域→擴增區(qū)域→擴增產(chǎn)物分析區(qū)域中的氣壓的方法進行,以防止擴增產(chǎn)物進入反應(yīng)室。放大前的區(qū)域以及氣流。需要嚴格的通風(fēng)設(shè)計。如果通風(fēng)設(shè)計不合理,風(fēng)速將會混亂甚至危害人體健康。
進入實驗室區(qū)域的工人應(yīng)遵循以下路徑:

公共清潔區(qū)更衣室(換洗衣服)-緩沖室-實驗區(qū)污染
工作人員離開實驗室的途徑是:
污染測試區(qū)-緩沖間-淋浴房(如果可能的話可以設(shè)置)-更衣室-公共清潔區(qū)
標準PCR實驗室設(shè)計規(guī)范
1.主要結(jié)構(gòu)
主體是彩色鋼板和鋁合金型材。房間內(nèi)的所有內(nèi)角和外角均由帶有內(nèi)部圓形鋁的鋁合金50制成,以解決易污染,積塵,難以清潔的問題。結(jié)構(gòu)牢固,線條簡潔,外觀大方,密封性好。
2.標準的三區(qū)分離和氣壓調(diào)節(jié)
PCR過程分為三個獨立的實驗區(qū)域:試劑制備,樣品制備和PCR擴增檢測。整個區(qū)域都有一條整體的緩沖走廊。每個獨立的實驗區(qū)域都配備了緩沖區(qū),每個區(qū)域都通過氣壓進行調(diào)節(jié),以防止試劑和樣本在整個PCR實驗過程中受到氣溶膠的污染,并減少擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
緩沖液Ⅰ,緩沖液Ⅱ和PCR擴增區(qū)的排風(fēng)扇可以打開排氣。實驗區(qū)域的外墻和每扇門都裝有可調(diào)節(jié)風(fēng)量的回風(fēng)孔,空氣通過回風(fēng)孔排入房間。 。
3.消毒
紫外線燈安裝在三個實驗區(qū)域和三個緩沖區(qū)的頂部以及透射窗內(nèi)部,用于消毒。
在試劑制備區(qū)和標本制備區(qū),還安裝了移動式紫外線燈,以對實驗臺進行局部消毒。
4.機械聯(lián)鎖不銹鋼傳送窗
試劑和標本通過機械互鎖不銹鋼(不建議使用電子互鎖方法)傳輸窗口交付,以確保在傳輸過程中不污染試劑和標本(個人分流)。
5.地面
建議使用PVC卷曲地板或自流地板作為地面,其完整性要好。易于清潔且耐腐蝕。如果沒有條件,可以使用水磨石地面,或者大瓷磚的接縫(至少800mm×800mm)應(yīng)小于2mm。
6.照明
該燈應(yīng)為純凈燈,以達到易于清潔,無灰塵堆積的特點。

pcr實驗室施工過程中應(yīng)注意:
●標準的安裝流程和全面的服務(wù)流程。
●嚴格遵循標準化,科學(xué)設(shè)計的安裝過程。
●安裝前,需要確定以下安裝條件:電源電壓,電源入口位置,電話網(wǎng)線入口位置,進水口壓力,最小安裝空間,地面平整度,通風(fēng)口,入口管和落水管位置等。,理想的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。
●實驗室的墻壁,包括天花板,應(yīng)具有牢固的結(jié)構(gòu)和良好的氣密性;所有內(nèi)角應(yīng)采用弧形過渡;墻壁應(yīng)光滑,不吸水,耐腐蝕,易于清潔和消毒;地板材料應(yīng)符合間隙,無泄漏,光滑度和耐腐蝕的要求。







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